تجميع عينات الدم Blood sample colliction
تشمل أخطاء تجميع العينات التى يمكن أن تؤثر على نتائج التحاليل الخطاء التالية :-
*أخطاء فى عملية السحب ذاتها
*حدوث تحلل لكرات الدم الحمراء Haemolysis
*أخذ عينة الدم على مانع تجلط غير مناسب أو بكمية غير مناسبة
*عدم ثبات بعض المواد فى عينة الدم المسحوبة .
الإحتياطات الواجب إتباعها أثناء عملية سحب الدم:
· عدم ربط الرباط المطاطى ( Tourniquet) بقوة أو لفترة طويلة على الذراع قبل عملية السحب لأن ذلك يؤدى إلى زيادة تركيز بعض المواد بالبلازما مثل :- الهيموجلوبين – بروتينات الدم وخاصة الألبيومين – الكالسيوم .
· عدم أخذ عينة الدم من وريد معلق بة محاليل للمريض حيث يجب إختيار وريد آخر ويفضل السحب من الذراع الآخر حيث تؤدى المحاليل المعطاة للمريض إلى تخفيف العينة أو زيادة تركيز بعض المواد مثل الجلوكوز إذا كان المريض يأخذ محلول الجلوكوز أو الصوديوم إذا كان المريض يأخذ محلول ملح Saline
· إدخال سن الإبرة برفق وبزاوية 45 درجة وسحب عينة الدم ببطء و إخراج الإبرة من الوريد برفق ثم وضع قطن مكان سحب العينة مع الضغط حتى لايحدث إرتشاح دموى تحت الجلد مكان سحب العينة مما يؤدى إلى ظهور لون أزرق مكان سحب العينة
ملحوظة الوريد الذى يمكن حسة باليد يفضل عن الوريد الذى يمكن رؤيتة لأن الوريد المرئى قد يكون سطحى ورفيع فلا يساعد على تدفق الدم بسهولة .
الإحتياطات اللازمة لتجنب حدوث تحلل للعينة (Avoiding heamolysis )
التحلل heamolysisهو حدوث تكسير لكرات الدم الحمراء RBCs يؤدى إلى خروج بعض المواد من داخل كرة الدم الحمراء إلى السيرم أو البلازما مما يؤدى إلى زيادة تركيز هذة المواد مما يعطى معة نتائج كاذبة لنتيجة تحليل هذة المادة مثل :- البوتاسيوم .
يمكن تجنب حدوث التحلل عن طريق
-عدم إستخدام إبر ذات قطر داخلى رفيع نسبيا مما يؤدى إلى إندفاع الدم خلالها بصعوبة فيؤدى إلى تكسيرها .
-تجنب سحب عينة الدم بسرعة وعنف
-أثناء تفريغ العينة من المحقن يجب خلع سن الإبرة وتفرغ العينة من المحقن مباشرة ببطء وعلى جدار الانبوبة .
-العينات المسحوبة على مانع تجلط يتم تقليبها برفق مع ملاحظة عدم رجها بعنف .
-إستخدام أنابيب جافة ونظيفة لتجميع عينة الدم لأن الماء يؤدى إلى حدوث تكسير ل RBCs
-عند فصل العينات فى جهاز الفصل سنترفيوج يراعى إستخدام سرعات معقولة مع التأكد من توازن الجهاز
-عدم تجميد عينات الدم بدون فصل ثم إعادة إسالتها مرة أخرى
* أنابيب تجميع العينات وموانع التجلط
1 - العينات الجافة : تسحب فى عدم وجود مانع تجلط وغالبا ما تشمل معظم تحاليل الكيمياء الروتينية وتفصل للحصول على السيرم Serum
تسحب العينة وتفرغ فى الأنبوبة ثم تترك فى الحضانة لتتجلط ثم تدار فى السنترفيوج ويفصل السيرم .
· ملحوظة : يفضل إستخدام الأنابيب الزجاجية عن البلاستيكية فى تجميع العينات الجافة إذا أردنا الحصول على السيرم بسرعة لأن الدم يحتاج لوقت أطول لحدوث الجلطة فى الأنابيب البلاستكية .
2- لتحاليل الكيمياء العاجلة والطارئة :- يفضل سحب العينة على مانع تجلط الهيبارين ثم فصل البلازما حيث لا يحدث الهيبارين تداخل فى نتائج معظم الإختبارات ويقلل من فرص حدوث تحلل للعينة .
يجب عدم إستخدام موانع التجلط الأخرى مثل الإديتا EDTA والسترات لأنها غالبا ما تحتوى على أملاح الصوديوم والبوتاسيوم التى تؤثر فى نتائج التحاليل خاصة أملاح الدم .
3- عينات تقدير الجلوكوز فى السيرم :- لتجنب حدوث نقص مستوى الجلوكوز فى المصل نتيجة حدوث تحلل الجلوكوز إلى لاكتيك أسيد بواسطة RBCs يجب فصل عينة الجلوكوز مباشرة بعد سحب العينة بحيث يفصل السيرم عن RBCs.
أو تسحب العينة على مانع تجلط ( الفلوريد ) حيث يؤدى إلى تثبيط عملية التحلل الإنزيمى للجلوكوز
4 – عينات صور الدم ( CBC ) :-يفضل أن تسحب عينة صورة الدم على مانع تجلط EDTA وذلك بنسبة 50 ميكرون EDTA
أو نقطة إلى 1 مل من الدم وتقلب برفق .
يفضل إستخدام الإديتا فى صورة محلول عن إستخدامها فى صورة بودرة .
إستخدام الهيبارين فى عينات صور الدم يعطى خلفية زرقاء عند عمل أفلام من صور الدم مما يصعب معة عد خلايا الدم لذلك يفضل عدم إستخدامة .
5- عينات الفصائل والتوافق ( blood grouping & Cross matching )
يفضل أن يستخدم مانع تجلط السترات ( سترات الصوديوم )
6 – عينات إختبارات تجلط الدم
مثل زمن البروثرومبين PT و APTT وزمن الثرومبين T T وجميع عوامل التجلط مثل عامل 5 –8 - 9 – 10 .
تسحب العينات على سترات الصوديوم بنسبة 1 جزء سترات + 9 أجزاء دم وغالبا 200 ميكرون سترات + 1800 ميكرون دم أو 100 ميكرون سترات + 900 ميكرون دم .
7- عينات سرعة الترسيب ( ESR )
يتم سحبها على مانع تجلط سترات الصوديوم بنسبة :
جزء سترات + 4 أجزاء دم وتقلب جيدا وغالبا ما تكون
400 ميكرون سترات + 1600 ميكرون دم أو 200 ميكرون سترات +800 ميكرون دم .
التغيرات التى تحدث على بعض المواد فى عينة الدم
1-- التغيرات بسبب التحلل Effects due to Haemolysis
يؤدى تكسير كرات الدم الحمراء إلى زيادة فى كل من :-
· البوتاسيوم ( K ) حيث يوجد بتركيزات عالية داخل RBCs
· الفوسفات
· إنزيم GOT حيث يتكون معظمة داخل RBCs
· إنزيم LDH حيث يؤدى التحلل لزيادة خطيرة فى نشاط هذا الإنزيم
· زيادة فى نسبة Bilirubin فى حالة التحلل الشديد
2- التغيرات على العينة بسبب تركها لفترة عدة ساعات دون فصل
· زيادة تركيز بعض المواد من خلال عبورها من أغشية RBCs إلى Serum
· نقص فى CO2 على مستوى سطح الدم مما يؤدى إلى إنخفاض تركيز البيكربونات HCO3 وكذلك زيادة مستوى الكلوريد فى البلازما .
· إنخفاض معدل الجلوكوز فى حالة عدم سحب العينة على فلوريد بسبب التحلل الإنزيمى بواسطة RBCs إلى لاكتيك أسيد Lactic Acid .
· إنخفاض نشاط بعض المواد ( Activity ) مثل إنزيم الفوسفاتيز الحمضى
Acid phosphatase وكذلك معظم عوامل التجلط .
فى عينات إختبارات التجلط مثل البروثرومبين P.T و APTT وقياس نشاط عوامل التجلط يجب فصل البلازما مباشرة وقياس نشاط العامل خلال 3 ساعات على الأكثر حتى لا يؤدى إلى فقدان ال Activity لعامل التجلط .
· التكسير الضوئى للبيلروبين Bilirubin بواسطة ضوء النهار أو الإضاءة الصناعية خاصة الفلورسنت . (البليروبين غير المقترن )
لتجنب حدوث التغيرات السابقة يراعى :-
فصل السيرم أو البلازما عن RBCs خلال ساعة على الأكثر .
سحب عينات الجلوكوز على مانع تجلط الفلوريد
حماية عينات البليروبين من الضوء المباشر ويفضل حفظها فى الظلام .
